食品(pin)快檢法(fa)

        喆(喆)圖(tu)小編(bian)就(jiu)來(lai)說說在(zai)樣品(pin)制(zhi)備時(shi)，能夠在(zai)短(duan)時(shi)間內(nei)出據(ju)檢測(ce)結果(guo)的行(xing)為稱(cheng)之為快速檢(jian)測。快速檢(jian)測體(ti)現(xian)在(zai)三方面：（1）實(shi)驗準(zhun)備(bei)要(yao)簡(jian)化(hua)；（2）樣品(pin)經(jing)簡(jian)單(dan)前(qian)處理(li)後即(ji)可測(ce)試，後采用先進快速的樣品(pin)處(chu)理(li)方式(shi)；（3）分(fen)析方法(fa)簡(jian)單(dan)，快速，準(zhun)確。

         1. 食品(pin)安(an)全問(wen)題主(zhu)要(yao)有(you)害汙染(ran)物： （1）農(nong)藥(yao),化(hua)肥(fei):有機(ji)磷(lin),有機(ji)氯，硝酸(suan)鹽(yan)；（2）獸藥(yao)：C20H32O，鎮(zhen)靜劑，抗(kang)生(sheng)素；（3）重金(jin)屬離子(zi)：鎘，鉛(qian)，汞(gong)，鉻(ge)，砷，鉬(mu)；（4）生(sheng)物毒素(su)：黃曲黴毒素(su)，嘔吐毒素(su)，肉(rou)毒素(su)；（5）致(zhi)病(bing)菌：大腸(chang)桿(gan)菌，沙門氏菌，葡萄球(qiu)菌。

         2. 快速檢(jian)測：包(bao)括樣品(pin)制(zhi)備在(zai)內(nei)，能夠在(zai)短(duan)時(shi)間內(nei)出據(ju)檢測(ce)結果(guo)的行(xing)為稱(cheng)之為快速檢(jian)測。快速檢(jian)測體(ti)現(xian)在(zai)三方面：（1）實(shi)驗準(zhun)備(bei)要(yao)簡(jian)化(hua)；（2）樣品(pin)經(jing)簡(jian)單(dan)前(qian)處理(li)後即(ji)可測(ce)試，後采用先進快速的樣品(pin)處(chu)理(li)方式(shi)；（3）分(fen)析方法(fa)簡(jian)單(dan)，快速，準(zhun)確。

         3. 食品(pin)安(an)全快速檢(jian)測分(fen)類(lei)：1.按分(fen)析地(di)點：現(xian)場快速檢(jian)測，實(shi)驗室快速檢(jian)測；2.按定性(xing)定(ding)量(liang)：定(ding)性(xing)快速篩(shai)選檢驗，半定(ding)量(liang)檢驗，全量(liang)檢(jian)驗。

         4. 農藥(yao)殘留(liu)檢測(ce)方法(fa)：(壹(yi))生(sheng)物(wu)法(fa)：（1）生物化(hua)學(xue)測(ce)定法(fa)(酶(mei)抑(yi)制(zhi)率(lv)法，速測(ce)卡法)；（2）分(fen)子生(sheng)物(wu)學(xue)方法(fa)(如(ru)：ELISA)；（3）活體(ti)生物(wu)測(ce)定(ding)法(發(fa)光細菌，大型水(shui)藻，家(jia)蠅)；（4）生物傳(chuan)感(gan)器法。 

       (二)化(hua)學方法(fa)：酶(mei)抑(yi)制(zhi)法(fa)、酶聯免(mian)疫(yi)檢測(ce)法。

         5. 免疫定義(yi)：機(ji)體(ti)識別(bie)自身非自身，並(bing)清除(chu)非自身大分(fen)子物(wu)質(zhi)，從(cong)而(er)保(bao)持(chi)機(ji)體(ti)內(nei)外環境平(ping)衡的壹(yi)種(zhong)生(sheng)理(li)反(fan)應(ying)。

         6. 免疫(yi)基(ji)本特(te)征：識(shi)別(bie)自身和(he)非自身，特(te)異(yi)性(xing)，免(mian)疫(yi)記(ji)憶(yi)。

         7. 免疫(yi)的基(ji)本功(gong)能：抵(di)抗(kang)感(gan)染(ran)，自身穩定(ding)，免疫(yi)監視。

         8. 抗(kang)原(yuan)定義：能刺(ci)激(ji)機(ji)體(ti)產生(sheng)免(mian)疫(yi)答應(ying)，並(bing)且能與答應(ying)物(抗(kang)體(ti)或效(xiao)應(ying)性(xing)淋巴細(xi)胞(bao))特(te)異(yi)性(xing)結合(he)的物質，稱(cheng)為抗(kang)原(yuan)(Antigen，Ag)。

         9. 抗(kang)原(yuan)具(ju)有(you)抗(kang)原(yuan)性(xing)：免(mian)疫(yi)原(yuan)性(xing)，反(fan)應(ying)原性(xing)。

         10. 抗(kang)原(yuan)分(fen)類(lei)(按抗(kang)原(yuan)性(xing)質(zhi))：*抗(kang)原(yuan)，半抗(kang)原(yuan)(某些藥(yao)物(wu))。

         11. 抗(kang)原(yuan)表(biao)位(wei)，又稱(cheng)抗(kang)原(yuan)決定簇(cu)：是位(wei)於(yu)抗(kang)原(yuan)物質分(fen)子表(biao)面或者其他(ta)部位的具(ju)有(you)壹(yi)定(ding)組(zu)成和(he)結構(gou)的特(te)殊化學(xue)基(ji)團。

         12. 抗(kang)體(ti)：有抗(kang)原(yuan)刺(ci)激(ji)動(dong)物的免疫系統(tong)後(hou)，由免疫系(xi)統B細(xi)胞(bao)增殖分(fen)化為漿細胞(bao)所產生(sheng)，分(fen)泌(mi)的壹(yi)類(lei)能與相應(ying)抗(kang)原(yuan)特(te)異(yi)性(xing)結合(he)的具(ju)有(you)免(mian)疫(yi)功(gong)能的球(qiu)蛋(dan)白(bai)。並(bing)非所有的免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)都(dou)是(shi)抗(kang)體(ti)。

         13. 抗(kang)體(ti)基(ji)本結構(gou)：a.重(zhong)鏈(lian)H 2條 輕鏈L 2條b.恒定區C區(qu) 可(ke)變區(qu)V區(qu) c.鉸鏈(lian)區d.Fab抗(kang)原(yuan)結合(he)片(pian)段(duan) Fc：可(ke)結晶(jing)片段(duan)。

         14. ELISA的原理(li)：（1）抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)能以(yi)物(wu)理(li)性(xing)吸(xi)附(fu)於(yu)固相(xiang)載體(ti)表(biao)面，可能是蛋白(bai)和(he)聚(ju)苯(ben)乙烯表(biao)面間的疏(shu)水性(xing)部(bu)分(fen)相互(hu)吸(xi)附(fu)，並(bing)保持其免(mian)疫學(xue)活性(xing)；（2）抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)可通(tong)過(guo)共(gong)價鍵與酶連(lian)接(jie)形(xing)成酶結合(he)物(wu),而(er)此種(zhong)酶(mei)結合(he)物(wu)仍(reng)能保持其免(mian)疫學(xue)和(he)酶學(xue)活性(xing)；（3）酶(mei)結合(he)物(wu)與(yu)相(xiang)應(ying)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)結合(he)後(hou)，可(ke)根(gen)據(ju)加入(ru)底物(wu)的顏(yan)色反(fan)應(ying)來(lai)判定是否(fou)有免疫(yi)反(fan)應(ying)的存在(zai)，而(er)且(qie)顏(yan)色反(fan)應(ying)的深淺(qian)是(shi)與標準(zhun)中(zhong)相(xiang)應(ying)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)的量成壹(yi)定(ding)比例的，因此，可(ke)以(yi)按底物(wu)顯(xian)色的程度(du)顯示(shi)實(shi)驗結果(guo)。

         15. ESISA的類(lei)型：（1）雙(shuang)抗(kang)夾(jia)心法(測微生物(wu))；（2）間接(jie)法(fa)測(ce)抗(kang)體(ti)；（3）競(jing)爭(zheng)法(fa)測(ce)抗(kang)原(yuan)(化肥(fei)農藥(yao))。

         16. 雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心法基(ji)本原(yuan)理(li)：利用(yong)連(lian)接(jie)於(yu)固相(xiang)載體(ti)上的抗(kang)體(ti)和(he)酶標抗(kang)體(ti)分(fen)別與(yu)樣品(pin)中(zhong)被檢(jian)測抗(kang)原(yuan)分(fen)子上兩(liang)個抗(kang)原(yuan)決定簇(cu)結合(he)，形(xing)成固相(xiang)抗(kang)體(ti)-抗(kang)原(yuan)-酶標抗(kang)體(ti)免疫(yi)復(fu)合(he)物(wu)，由於(yu)反(fan)應(ying)系統(tong)中(zhong)固相(xiang)抗(kang)體(ti)和(he)酶標抗(kang)體(ti)的量相對於(yu)待(dai)測(ce)抗(kang)原(yuan)是過(guo)量的，因此復(fu)合(he)物(wu)的形(xing)成量與(yu)待(dai)測(ce)抗(kang)原(yuan)的含量成正比(在(zai)方法(fa)可(ke)檢(jian)測(ce)範圈(quan)內(nei)),測定復(fu)合(he)物(wu)中的酶作用於(yu)加入(ru)的底物(wu)後(hou)生(sheng)成的有色物質(zhi)量(liang)(OD值(zhi)) ，即(ji)可確定待(dai)測(ce)抗(kang)原(yuan)含量。

         17. 間接(jie)法(fa)測(ce)抗(kang)體(ti)基(ji)本原(yuan)理(li)：將(jiang)抗(kang)原(yuan)連接(jie)到固相載體(ti)上，樣品(pin)中(zhong)待(dai)測(ce)抗(kang)體(ti)與之結合(he)成固相(xiang)抗(kang)原(yuan)-受(shou)檢抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)，再用(yong)酶(mei)標二抗(kang)(針(zhen)對(dui)案(an)檢(jian)抗(kang)體(ti)的抗(kang)體(ti)，如(ru)羊(yang)抗(kang)人ICG抗(kang)體(ti))與固(gu)相(xiang)免(mian)疫復(fu)合(he)物(wu)中的抗(kang)體(ti)結合(he)，形(xing)成固相(xiang)杭原(yuan)-受(shou)檢抗(kang)體(ti)-酶栝(kuo)二抗(kang)復(fu)合(he)物(wu)，測定(ding)加(jia)底物(wu)後(hou)的顯色程度(du)，測定(ding)待(dai)測(ce)抗(kang)體(ti)含量(liang)。

         18. 競(jing)爭(zheng)法(fa)測(ce)抗(kang)原(yuan)基(ji)本原(yuan)理(li)：首(shou)先將(jiang)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)吸(xi)附(fu)於(yu)固相(xiang)載體(ti)表(biao)面(包(bao)被(bei))，經(jing)洗(xi)滌後分(fen)成兩組(zu)：壹(yi)組(zu)加(jia)酶(mei)標記(ji)抗(kang)原(yuan)和(he)被測(ce)抗(kang)原(yuan)的混合液，而(er)另(ling)壹(yi)組(zu)只加(jia)酶標記(ji)抗(kang)原(yuan)，標本中(zhong)的抗(kang)原(yuan)和(he)壹(yi)定(ding)量(liang)的酶標抗(kang)原(yuan)競(jing)爭(zheng)與(yu)固(gu)相(xiang)抗(kang)體(ti)結會(hui)(標本中(zhong)抗(kang)原(yuan)量含量愈(yu)多(duo)，結含(han)在(zai)固(gu)相(xiang)上的酶抗(kang)原(yuan)愈少，MAX後的顯色也愈(yu)淺(qian))，再(zai)經孵育(yu)洗滌後加底物(wu)顯(xian)色，兩組(zu)底物(wu)降解量之差，即(ji)為我(wo)們(men)所要(yao)測(ce)定的未知抗(kang)原(yuan)的量。

         19. 農藥(yao)殘留(liu)生物(wu)化(hua)學(xue)測定方法(fa)：（1）農(nong)藥(yao)速測(ce)卡法；（2）農(nong)藥(yao)殘留(liu)分(fen)光光度(du)法(抑(yi)制(zhi)率(lv)法)。

         20. 速測(ce)卡法檢(jian)測(ce)原理(li)：膽(dan)堿醋(cu)酶可(ke)催(cui)化靛酚(fen)乙酸(suan)酮(tong)(紅(hong)色)水解(jie)為乙酸(suan)與(yu)靛酚(fen)(藍色)有機(ji)磷(lin)或氨基(ji)甲酸(suan)脂(zhi)類(lei)農(nong)藥(yao)對(dui)膽(dan)堿酯(zhi)酶有(you)抑(yi)制(zhi)作(zuo)用，使催(cui)化、水(shui)解(jie)，變色的過(guo)程發(fa)生改(gai)變，由此判(pan)斷樣品(pin)中(zhong)是否(fou)含有過(guo)量有(you)機(ji)磷(lin)或氨基(ji)甲酸(suan)酯(zhi)類(lei)農(nong)藥(yao)的殘留(liu)。分(fen)析步驟(zhou)：A.提(ti)取：幹凈(jing)的菜樣品(pin)---剪(jian)碎(1CM左(zuo)右見方)---取5g於(yu)帶蓋瓶(ping)中---加純凈(jing)水或緩沖溶(rong)液(ye)(l0mL)---震(zhen)搖(yao)(50次(ci))---靜置(2min以(yi)上)。B.預反(fan)應(ying)：取壹(yi)片(pian)速測(ce)卡，用白(bai)色藥(yao)片(pian)沾(zhan)取提(ti)取液，放置10min以(yi)上進行(xing)預反(fan)應(ying)，有條件(jian)時在(zai)37℃恒溫裝(zhuang)放置中10min.預反(fan)應(ying)後的藥(yao)片(pian)表(biao)面必(bi)須保持(chi)濕潤。C.反(fan)應(ying)：將(jiang)速測(ce)卡對折(zhe)，用(yong)手捏(nie)3min或用恒溫裝(zhuang)置恒溫3min，使紅(hong)色藥(yao)片(pian)與白(bai)色藥(yao)片(pian)疊合發(fa)生反(fan)應(ying) d.每(mei)批測定應(ying)設壹(yi)個(ge)純凈(jing)水或緩沖液的空白(bai)對(dui)照(zhao)卡。

         21.速測(ce)卡法結果(guo)判(pan)定(ding)：與(yu)空白(bai)對(dui)照(zhao)卡比較，白(bai)色藥(yao)片(pian)不(bu)變色或略有淺(qian)藍色均為陽(yang)性(xing)結果(guo)，不(bu)變藍為陽(yang)性(xing)結果(guo)，說(shuo)明農藥(yao)殘留(liu)量較(jiao)高(gao)，顯(xian)淺(qian)藍色為弱(ruo)陽(yang)性(xing)結果(guo)，說(shuo)明農藥(yao)殘留(liu)兩相(xiang)對(dui)較(jiao)低。白(bai)色藥(yao)片(pian)變為天(tian)藍色或空白(bai)對(dui)照(zhao)卡片相(xiang)同(tong)，為陰(yin)性(xing)結果(guo)。對(dui)陽(yang)性(xing)結果(guo)的樣品(pin)，可(ke)用其他(ta)分(fen)析方法(fa)進壹(yi)步確定具(ju)體(ti)農藥(yao)品(pin)種(zhong)和(he)含量(liang)。

         22.農(nong)藥(yao)殘留(liu)分(fen)光光度(du)計(ji)法(fa)(抑(yi)制(zhi)率(lv)法)原理(li)：壹(yi)定(ding)條件(jian)下，有機(ji)磷(lin)和(he)氨基(ji)甲酸(suan)酯(zhi)類(lei)農(nong)藥(yao)對(dui)膽(dan)堿酶(mei)正常功(gong)能有抑(yi)制(zhi)作(zuo)用，其抑(yi)制(zhi)率(lv)與農藥(yao)的濃度(du)成正相(xiang)關.，正(zheng)常情(qing)況(kuang)下(xia)，酶(mei)催(cui)化乙酰(xian)膽(dan)堿水(shui)解，其水(shui)解產(chan)物(wu)與(yu)顯色劑反(fan)應(ying)，產生(sheng)黃(huang)色物質(zhi)，用(yong)分(fen)光光度(du)計(ji)在(zai)412nm處(chu)測(ce)定(ding)發(fa)光度(du)隨時間的變化(hua)值(zhi)，計(ji)算(suan)出(chu)抑(yi)制(zhi)率(lv)，通過(guo)抑(yi)制(zhi)率(lv)可以(yi)判(pan)斷出樣品(pin)中(zhong)是否(fou)有有機(ji)磷(lin)確和(he)氨基(ji)甲酸(suan)酯(zhi)類(lei)農(nong)藥(yao)的存在(zai)。

         23. 酶(mei)傳(chuan)感(gan)器：它將(jiang)活性(xing)物(wu)質(zhi)酶(mei)覆蓋在(zai)電(dian)極(ji)表(biao)面，酶與被測的有機(ji)物(wu)或無機(ji)物(wu)反(fan)應(ying)，形(xing)成壹(yi)種(zhong)能被電極響應(ying)的物質。

         24. 生物(wu)傳(chuan)感(gan)器在(zai)食品(pin)分(fen)析中的應(ying)用：（1）食品(pin)成分(fen)分(fen)析；（2）食品(pin)添(tian)加劑(ji)的分(fen)析；（3）農藥(yao)和(he)抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)量分(fen)析；（4）微生物和(he)生物(wu)毒素(su)的檢驗；（5）食品(pin)限(xian)度(du)的檢驗。

         25.蔬菜(cai)中(zhong)硝酸(suan)鹽(yan)含(han)量(liang)的快速測(ce)定原理(li)：將(jiang)NO3-還原(yuan)N02-後(hou)，芳(fang)香胺與(yu)亞硝酸(suan)根(gen)離子(zi)發(fa)生重(zhong)氮(dan)化(hua)反(fan)應(ying)，生成重氮(dan)鹽(yan)，重(zhong)氮(dan)鹽(yan)再(zai)與(yu)芳香族化(hua)合(he)物發(fa)生偶(ou)聯反(fan)應(ying)，生成壹(yi)種(zhong)紅(hong)顏(yan)色偶氮(dan)化(hua)合物(偶(ou)氮染(ran)料(liao))，其顏(yan)色強度(du)與硝酸(suan)鹽(yan)含(han)量(liang)呈正比，通過(guo)試紙(zhi)由無色變為紅(hong)色，變色的試紙放入(ru)基(ji)於(yu)光學傳感(gan)器原理(li)的硝酸(suan)鹽(yan)檢(jian)測(ce)儀(yi)中(zhong)比色測定(ding)硝酸(suan)鹽(yan)含(han)量(liang)。 儀(yi)器與材料(liao)：硝酸(suan)鹽(yan)試(shi)紙(zhi). 快速測(ce)定儀(yi)。

         26.硝酸(suan)鹽(yan)速測(ce)管(guan)：（1）適用範圍(wei)：乳(ru)品(pin)、飲(yin)用水(shui)、蔬菜(cai)等食物(wu)中(zhong)硝酸(suan)鹽(yan)的快速檢(jian)測；（2）方法(fa)原(yuan)理(li)：按照(zhao)國標GB 5009. 33鹽(yan)酸(suan)萘乙二胺(an)顯色原理(li)，在(zai)格林(lin)試(shi)劑(ji)中加(jia)入(ru)硝酸(suan)鹽(yan)轉(zhuan)化(hua)劑(ji)，並(bing)將(jiang)其做成速測(ce)管(guan)，速測(ce)管(guan)中的試劑可將(jiang)N03-還原(yuan)為N02-後(hou)，再(zai)與芳香胺(氨基(ji)苯磺(huang)酸(suan)) 發(fa)生重(zhong)氮(dan)反(fan)應(ying)，生成重氮(dan)鹽(yan)，重(zhong)氮(dan)鹽(yan)再(zai)與(yu)芳香族化(hua)合(he)物( A-祭(ji)胺)發(fa)生偶(ou)聯反(fan)應(ying)，生成紅(hong)色偶氮(dan)化(hua)合物(又(you)叫偶氮(dan)染(ran)料(liao))，顏(yan)色深淺(qian)與(yu)硝酸(suan)鹽(yan)含(han)量(liang)成正比，與標準(zhun)色卡比對，確定硝酸(suan)鹽(yan)含(han)量(liang)。

         27. 獸藥(yao)殘留(liu)定義(yi)：動(dong)物產品(pin)的任(ren)何(he)可食部(bu)分(fen)所含獸藥(yao)的母體(ti)化合(he)物(wu)及(ji)其代(dai)謝物(wu)，以(yi)及(ji)與獸藥(yao)有(you)關的雜(za)質殘留(liu)。

         28.獸藥(yao)殘留(liu)快速檢(jian)測微生(sheng)物(wu)法檢(jian)測原理(li)：檢測(ce)管(guan)中的培(pei)養(yang)基(ji)預先接(jie)種(zhong)了嗜(shi)熱脂(zhi)肪(fang)芽(ya)孢桿(gan)菌，並(bing)含有細(xi)菌生長所需的營養以(yi)及(ji)pH指示劑。只需加(jia)入(ru)100ul樣品(pin)於(yu)檢測(ce)管(guan)中。將(jiang)含有(you)樣品(pin)的檢測管(guan)放入(ru)64±1℃水浴鍋中加熱壹(yi)段(duan)時(shi)間。奶或奶制(zhi)品(pin)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中迅(xun)速擴散，若(ruo)該樣品(pin)中(zhong)不(bu)含(han)有(you)抗(kang)生(sheng)素(或者抗(kang)生(sheng)素低於(yu)檢測(ce)值(zhi))，嗜(shi)熱脂(zhi)肪(fang)芽(ya)孢桿(gan)菌將(jiang)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中生(sheng)長，葡(pu)萄(tao)糖分(fen)解後(hou)所產生(sheng)的酸(suan)會(hui)改變pH指(zhi)示(shi)劑顏(yan)色，由紫色變為黃(huang)色。相反(fan)若(ruo)高於(yu)檢測(ce)限的抑(yi)菌劑，則嗜(shi)熱脂(zhi)肪(fang)芽(ya)孢桿(gan)菌不(bu)會(hui)生(sheng)長，指(zhi)示(shi)劑(ji)顏(yan)色不(bu)變 仍(reng)為紫(zi)色。 黃色表(biao)明該樣品(pin)沒(mei)有抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)或抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)的含量低於(yu)試劑(ji)盒的檢測限(陰(yin)性(xing)) ，紫(zi)色表(biao)明該樣品(pin)中(zhong)含有(you)抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)且濃度(du)高於(yu)試劑(ji)盒的檢測限(陽(yang)性(xing)) 如(ru)果介(jie)於(yu)黃色紫色之間，則說(shuo)明該樣品(pin)可(ke)能不(bu)含(han)抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)或者抗(kang)生(sheng)素殘留(liu)的含量低於(yu)試劑(ji)盒的檢測限(部(bu)分(fen)陽性(xing))。

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